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      簡述器官芯片的使用指南

      更新時間:2025-06-25      點擊次數(shù):62
        一、器官芯片的基本組成:
        1.芯片結(jié)構(gòu)
        微流控控系統(tǒng):包含微通道、腔室和閥門,用于細胞培養(yǎng)和流體控制。
        細胞培養(yǎng)區(qū)域:通常由水凝膠、基質(zhì)膠或納米材料構(gòu)成,模擬器官的三維微環(huán)境。
        傳感器與檢測模塊:集成電極、光學(xué)探頭或生化傳感器,實時監(jiān)測細胞活性、代謝產(chǎn)物等。
        2.配套設(shè)備
        注射泵或壓力控制器:用于精確調(diào)控流體流動。
        顯微鏡或成像系統(tǒng):觀察細胞形態(tài)和動態(tài)變化。
        數(shù)據(jù)采集與分析軟件:記錄實驗參數(shù)(如流速、溫度、pH值等)。
        二、器官芯片使用前準備:
        1.芯片檢查與預(yù)處理
        檢查芯片是否完好,無裂紋或污染。
        用70%乙醇或無菌水清洗芯片表面,紫外照射滅菌30分鐘。
        若需包被基底膜,按說明書處理培養(yǎng)區(qū)域。
        2.細胞準備
        選擇符合實驗需求的細胞類型。
        調(diào)整細胞密度至適宜濃度,懸浮于培養(yǎng)基中。
        若需共培養(yǎng),提前混合不同細胞類型。
        3.培養(yǎng)基與試劑
        使用無菌、無酚紅的培養(yǎng)基,并添加生長因子或激素。
        預(yù)溫培養(yǎng)基至37℃,避免溫度波動影響細胞活性。
        三、器官芯片操作流程:
        1. 細胞接種
        加載細胞:
        通過注射泵或移液槍將細胞懸液緩慢注入芯片的腔室,避免產(chǎn)生氣泡。
        對于動態(tài)灌流模型,需確保細胞在微通道中均勻分布。
        固化細胞:
        若使用水凝膠,需通過離子交換或溫度控制使其交聯(lián)。
        靜置30-60分鐘,讓細胞貼壁。
        2. 流體灌注與參數(shù)設(shè)置
        連接流體系統(tǒng):
        將芯片進出口與注射泵、儲液器連接,確保密封性。
        設(shè)置流速,模擬毛細血管血流速度。
        環(huán)境控制:
        將芯片置于37℃、5% CO2培養(yǎng)箱中,或使用恒溫加熱板維持溫度。
        定期更換儲液器中的新鮮培養(yǎng)基,避免代謝廢物積累。
        3. 功能驗證與實驗干預(yù)
        生理功能檢測:
        通過傳感器監(jiān)測細胞代謝。
        用熒光染料評估細胞活力,或用TUNEL染色檢測凋亡。
        實驗干預(yù):
        添加藥物、毒素或病原體,觀察器官反應(yīng)。
        調(diào)整流速或施加機械刺激(如剪切力),模擬病理狀態(tài)。
        4. 數(shù)據(jù)記錄與分析
        實時監(jiān)測:
        使用成像系統(tǒng)記錄細胞形態(tài)變化。
        通過電化學(xué)傳感器檢測離子濃度。
        樣本采集:
        從出口收集灌流液,用于ELISA、質(zhì)譜或測序分析。
        固定芯片后切片,進行免疫熒光染色或RNA提取。
       

       

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